在培养基中，不耐热的物质通常不能使用高温高压的灭菌方法，因为高温会破坏这些物质的活性或使其降解。对于这些不耐热的物质，一般采用以下灭菌方法： 1. **过滤灭菌**： - 原理：通过具有特定孔径的滤膜过滤液体，细菌、真菌的孢子等因大于滤膜孔径而被阻挡，实现除菌。 - 适用物质：一些生长因子，如赤霉素（GA）、玉米素、脱落酸、尿素和某些维生素等。 - 操作细节：先将除去了不耐热物质的培养基其他成分经高压灭菌后置于超净工作台上冷却至适当温度，再将过滤灭菌后的该化合物按计划用量依次加入，摇匀，凝固后即可使用。如果是液体培养基，则可在冷却到室温后再加入。 - 滤膜选择：除菌滤膜其孔径尺寸一般要小于或等于0.4μm。 - 装置选择：当需要过滤灭菌的液体量大时，常使用抽滤装置；液量少时可用注射过滤器。 2. **其他非热灭菌方法**： - 还有一些其他的非热灭菌方法可能也被用于特定类型的不耐热物质，但这些方法在培养基中的应用相对较少，可能包括辐射灭菌（如紫外线、γ射线等）和气体灭菌（如环氧乙烷等）。然而，这些方法需要特定的设备和条件，且可能引入其他潜在的污染风险。 总之，在培养基中处理不耐热的物质时，过滤灭菌是最常用且有效的方法。通过选择合适的滤膜和适当的操作方式，可以确保这些物质的活性和稳定性得到保留，同时实现有效的除菌效果。
