基于网络药理学和实验验证探讨益气逐瘀方治疗缺血性脑卒中的作用机制时，关键问题涉及多个方面，包括数据的获取、分析、验证以及机制的解释。以下是几个核心关键问题： ### 1. 数据获取与筛选 **关键问题**： - **如何选择数据库**：选取哪些数据库来筛选益气逐瘀方中的活性成分和潜在靶点？例如，TCMSP（中药系统药理学数据库与分析平台）、Chemistry Database、GeneCards、OMIM、DRUGBANK等。 - **筛选标准设定**：如何设定活性成分和靶点的筛选标准？如口服生物利用度(OB)和类药性(DL)的阈值设定。 ### 2. 网络构建与分析 **关键问题**： - **疾病-靶点网络构建**：如何构建益气逐瘀方治疗缺血性脑卒中的疾病-靶点网络？如何识别和筛选关键靶点？ - **PPI网络构建**：如何使用STRING等数据库构建蛋白互作网络(PPI)，以进一步筛选核心靶点？ - **功能富集分析**：如何基于Bioconductor数据库和R软件等工具进行GO（基因本体）和KEGG（京都基因与基因组百科全书）富集分析，以理解潜在作用通路？ ### 3. 实验验证 **关键问题**： - **动物模型建立**：如何建立合适的动物模型（如大脑中动脉栓塞模型MCAO）来模拟缺血性脑卒中的病理过程？ - **疗效评价指标**：选择哪些指标来评估益气逐瘀方的疗效？如神经功能缺损评分、血清炎症因子水平、脑梗死率、脑组织病理变化等。 - **分子生物学验证**：如何采用分子生物学方法（如Western blot、免疫组化等）验证关键靶点和信号通路的调控？ ### 4. 机制解释 **关键问题**： - **作用机制阐述**：基于网络药理学和实验验证的结果，如何阐述益气逐瘀方治疗缺血性脑卒中的具体作用机制？ - **多成分多靶点作用**：如何解释益气逐瘀方多成分、多靶点的作用特点？ - **信号通路分析**：哪些信号通路在益气逐瘀方治疗缺血性脑卒中过程中起关键作用？ ### 5. 交叉验证与进一步研究方向 **关键问题**： - **交叉验证**：如何在不同数据库和实验条件下进行交叉验证，以确保结果的可靠性和准确性？ - **进一步研究**：基于当前研究，如何提出未来进一步的研究方向？如是否考虑更复杂的模型、更多的分子生物学技术等。 综上所述，基于网络药理学和实验验证探讨益气逐瘀方治疗缺血性脑卒中的作用机制时，需要解决数据获取与筛选、网络构建与分析、实验验证、机制解释以及交叉验证与进一步研究方向等多个关键问题。
