为了预防接种材料长细菌，可以遵循以下几个关键步骤和措施： 1. **彻底灭菌**： - 培养基：耐高温的培养基需要在**121-123℃**条件下灭菌**20-30分钟**。这是保证培养基无菌的基础。 - 器具：所有接种过程中使用的器具，如镊子、培养皿等，都需要经过高温灭菌处理。每使用一次后，应蘸酒精在酒精灯火焰上灼烧灭菌，确保无菌。 - 外植体：对于作为接种材料的外植体，需要进行彻底的表面消毒，以减少外生菌和内生菌的带菌量。 2. **选择适当的外植体**： - 选择幼嫩、不带泥土的材料，避免使用多年生的木本材料或老化的材料，因为它们通常带有更多的细菌。 - 如果可能，应在室内或无菌条件下对枝条进行预培养，使其发枝，然后用新抽的嫩枝作为外植体，以减少材料的污染。 3. **环境清洁与操作规范**： - 定期对接种环境进行熏蒸消毒，确保环境清洁无菌。 - 在超净工作台中操作时，应提前开启通风装置并打开紫外灯灭菌。操作前用75%酒精擦拭整个操作台面，并严格遵守无菌操作规程。 - 工作人员在接种前必须洗手，并用70%酒精棉球擦拭双手。在操作过程中，每接种一两瓶材料后，应再次用酒精擦手，以避免带入细菌。 4. **注意培养条件**： - 确保培养条件适宜，如温度、湿度和氧气供应等，以避免因培养条件不当而引起的细菌污染。 5. **单独处理污染的培养瓶和器皿**： - 一旦发现培养瓶或器皿被污染，应立即将其单独浸泡、单独清洗，并在条件允许的情况下灭菌后再清洗，以防止污染扩散。 通过上述措施，可以有效预防接种材料长细菌的问题，确保植物组织培养过程的顺利进行。
